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PA317逆轉錄病毒包被的NIH3T3細胞

簡要描述:PA317逆轉錄病毒包被的NIH3T3細胞
細胞名稱:逆轉錄病毒包被的NIH3T3細胞
細胞別稱:PA317
細胞貨號:SNL-146
細胞種屬:小鼠
生長情況:貼壁

  • 產品型號:SNL-146
  • 廠商性質:生產廠家
  • 更新時間:2023-05-24
  • 訪  問  量:607
詳細介紹
品牌其他品牌CAS詳見說明書
分子式詳見說明書純度詳見說明書
分子量詳見說明書貨號SNL-146
規格T25瓶供貨周期現貨
主要用途實驗應用領域化工,生物產業,能源

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PA317逆轉錄病毒包被的NIH3T3細胞

PA317逆轉錄病毒包被的NIH3T3細胞

---尚恩生物 186278592O3---

一、細胞基本屬性
細胞名稱:逆轉錄病毒包被的NIH3T3細胞
細胞別稱:PA317
細胞貨號:SNL-146
細胞種屬:小鼠
生長情況:貼壁
培養條件:H-DMEM+10%FBS+1%雙抗
培養環境:air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5%
二、細胞培養操作
換液周期2-3天
培養基體積T25瓶10-12ml;10cm皿12-15ml
傳代比例1:2-1:4(具體情況視細胞生長速度及密度決定)
傳代方法1.盡量吸干凈T25瓶原培養基;
2.加3-4ml 常溫PBS輕輕潤洗細胞10-20s,吸走潤洗的PBS;
3.T25瓶加1ml左右胰M,輕輕晃動培養瓶以使胰M鋪勻瓶底細胞層;
4.將培養瓶放入37度培養箱消化;
5.消化到細胞間隙變大,但未*脫落時加2-3ml*培養基終止胰M消化;
6.混勻細胞,900rpm離心3-5min,棄上清;
7.加新的*培養基輕輕重懸細胞,均勻分到新的培養瓶里;
8.補足*培養基,將培養瓶放回培養箱靜置培養;
注意事項不同品牌胰M消化時間差別較大,注意嚴格控制消化時間
消化傳代細胞時吹打細胞注意盡量輕柔,不要產生過多氣泡以免影響細胞狀態。
三、細胞凍存操作
凍存液配方92%FBS+8%DMSO(新手推薦)或92%*培養基+8%DMSO(高手推薦);
凍存規格200-300萬/ml,1ml每管
凍存方法1.消化并離心獲得細胞沉淀后,加配置好的凍存液輕輕重懸細胞;
2.將細胞懸液盡快移入已經做好標記的凍存管;
3.將凍存管轉入程序凍存盒,放入-80度冰箱過夜,第二天轉入液氮保存;沒有程序凍存盒的實驗室,加入細胞后可以將凍存管放在泡沫盒中4度靜置5-10min,再-20度靜置2h后轉入-80度過夜,第二天轉入液氮保存
注意事項凍存細胞轉入液氮后及時復蘇一管檢查細胞凍存活性,若有異常,及時調整實驗方案


收貨處理方式(T25瓶/凍存管)

T25】

①快遞保存溫度:室溫

②初步平衡:T25瓶表面消毒后,放37度培養箱平衡復溫2h以上

③處理方式:吸走大部分培養基,留10-12ml培養基,拍照并觀察細胞。密度80%以上即可吸走培養基消化傳代,若密度低于80%可以留10-12 ml繼續培養至細胞密度80%以上

④接種方式:T25傳代第①次建議1:2傳代,即瓶T25傳成兩瓶

⑤注意事項:若細胞出現漂浮,T25瓶不開封,放至37度培養箱過夜,若細胞貼壁即說明活性正常,按正常操作消化傳代即可;若未貼壁,收集細胞培養基離心后,將細胞重懸接種到新的培養瓶中,同時原瓶還貼壁的細胞加培養基繼續培養
發貨T25瓶裝滿大約有75ml培養基,可以收集起來,1500rpm離心5min后,取上清4度保存,用于培養細胞,以平穩過渡到客戶自己的培養基

【凍存管】

①快遞保存溫度:液氮長期保存或-80度3天以內

②初步平衡:無須平衡,直接放入-80冰箱或者液氮罐保存

③處理方式:37度水浴搖晃盡快融化細胞,直接在凍存管內將細胞離心。離心轉速以離心力150g(約900rpm)左右,1min為宜,棄上清,沉淀用新鮮培養基重懸后接種到10cm培養皿,顯微鏡下觀察細胞并拍照,24h后換液一次

④接種方式:一管細胞建議接種到10cm培養皿或者T25瓶

⑤注意事項:收貨時若發現干冰化完,檢查凍存管是否融化,若已融化需直接離心細胞接種觀察,若未融化可以將細胞按正常步驟保存,以上情況及時反饋
干冰發貨的細胞只能在-80保存3天左右,長時間保存會出現活性下降。干冰發貨均為兩支,客戶先復蘇一支,若復蘇失敗及時聯系我方并在我方指導下復蘇第二支。若客戶同時復蘇兩支均狀態不佳,我方將不提供免費售后服務

特殊情況:

1.若培養瓶或者凍存管出現破碎或漏液情況,及時拍照聯系銷售反饋,按指導進行進一步處理。若只是外包裝破損一般不影響培養瓶和凍存管,請放心使用。

2.若無法觀察到細胞,建議收集細胞培養基,1200rpm離心5min,觀察細胞沉淀量,并用少量培養基重懸沉淀后,取部分懸液放到計數板或者載玻片上觀察細胞。

3.部分細胞增殖較快,發貨細胞量較多時,培養基可能出現顏色變黃現象。繼續培養使用此類培養基時,需要及時觀察培養基顏色變化,縮短培養基換液周期,并每瓶多加2-3ml培養基。

4.收貨當天不處理細胞時,T25瓶可以消毒拆封口膜后不擰開瓶蓋放37度培養箱靜置過夜,但不建議超過24h;凍存管可以直接放液氮長期保存或-80度3天以內,必須一周內復蘇一只培養檢查,否則將超過一周售后期。


關于售后:

1.所有細胞免費售后期為一周,一周內細胞培養出現異常及時拍照反饋。超出一周沒有任何反饋視為細胞培養正常,后期若出現培養問題不再免費重發。

2. 申請售后時請提供細胞收貨時及反饋售后當天細胞清晰照片及培養信息,若無清晰照片及相應信息,不予免費售后;若文件較多不方便在線聯系或傳送,可以向銷售索要細胞情況表,填寫后反饋給銷售。

3. 售后僅針對由于細胞自身狀態問題導致不可傳代的情況,若客戶收貨一周內已經傳代或轉移細胞多次,出現死亡或者污染時不予免費售后;若客戶在我方未允許的情況下,擅自遺棄細胞,視為客戶自身問題導致細胞異常,不予免費售后。

4. 細胞在不同實驗室培養由于所使用培養基及血清品牌、個人操作習慣、培養瓶品牌等諸多培養條件不盡相同,導致細胞培養形態、生長速度、貼壁情況均可能有所差異,對于此類細胞適應環境生長的行為,不予過度解釋或免費售后。

5. 凍存細胞發貨2管,客戶先復蘇一支,若復蘇失敗及時聯系我方并在我方指導下復蘇第二支。若客戶未反饋并復蘇2管失敗,我方將不提供免費售后服務。凍存細胞售后均發復蘇培養的,若要重發凍存細胞,需補加干冰運輸費用。

6. 客戶自行凍存細胞一定要注意凍存后復蘇一管檢查凍存活性,避免凍存死亡導致絕種。我方不對客戶凍存細胞死亡負責,客戶凍存細胞死亡時不予免費售后。

7. 細胞收貨后,請收集發貨培養基培養至少一瓶細胞,用于確定細胞培養條件及實驗操作是否合適。


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