選擇合適的Vero細胞應該考慮品牌聲譽、供應商支持、細胞來源、細胞狀態和存儲條件等因素,以確保所購買的細胞能夠滿足您的實驗需求和研究目的。是種常用的猴腎細胞系,在細胞學研究和生物制品制備中廣泛應用。
1.品牌選擇:是種非常常見的哺乳動物細胞系,因此市面上有許多不同品牌供應。
-供應商支持和服務:選擇提供良好售后支持和技術服務的供應商,以便在使用過程中獲得幫助和解決問題。
2.細胞源選擇:來源于非洲綠猴腎細胞,國內外供應商提供來自不同的細胞庫或資源。在選擇細胞源時,可以考慮以下因素:
-原始材料的質量和純度:確保細胞源的純度和質量,以避免可能的污染或混雜。
-細胞文化特性:了解供應商提供的細胞的適用范圍、表型特點等,以確保其適合您的研究目的。
3.細胞狀態選擇:在購買時,可以選擇凍存細胞、傳代細胞或已經培養的細胞。這取決于您的實驗需求和實驗計劃。
-凍存細胞:保存在液氮中的細胞,需要解凍復蘇后才能使用。
-傳代細胞:已經經過了幾代的細胞,可以直接用于培養和實驗。
-已培養的細胞:已經培養和擴增的細胞,可以直接用于實驗。
4.細胞存儲條件:存儲條件非常重要,可以根據供應商提供的存儲建議來選擇合適的細胞。
-存儲溫度和條件:通常,凍存細胞應該保存在液氮中,傳代細胞和已培養的細胞則應該在低溫下保存,如-80°C。
-存儲液體:根據供應商的建議,使用適當的細胞保存液保存細胞,以確保其保存質量和穩定性。
5.可能的應用:可以用于各種實驗應用,如病毒培養、病毒傳染性研究、免疫學研究等。在購買細胞時,可以參考供應商提供的相關應用信息,以確定其適用性和可靠性。
Vero細胞的操作使用步驟:
1.使用含有DMEM(Dulbecco'sModifiedEagleMedium)培養基,加入10%胎牛血清(FBS)、青霉素和鏈霉素的混合物(濃度分別為100U/ml和100μg/ml)。
2.將Vero細胞從液態氮中取出,迅速用37℃預熱的培養基解凍,加入培養基后輕輕混勻。
3.細胞密度達到80-90%時,將細胞從培養瓶中用0.25%胰蛋白酶-EDTA進行消化,停止消化后加入培養基,通過離心收集細胞沉淀,用適量培養基稀釋,然后轉移到新的培養瓶中。
4.將培養瓶放入37℃、5%CO2的細胞培養箱中,每2-3天更換一次培養基。
Vero細胞的維護保養方法:
1.每2-3天更換一次培養基,當培養基變黃或有明顯的酸味時應立即更換。
2.細胞密度不宜過高,細胞達到80-90%密度時進行傳代以避免細胞過度增殖。
3.細胞應保持正常的增殖狀態,定期觀察細胞的形態,并用顯微鏡檢查細胞的污染情況,如有污染應立即處理。
4.當需要長時間保存Vero細胞時,可將其凍存于液態氮中。凍存前應將細胞培養至穩定生長期,使用1mL培養基和1mL二甲基亞砜混勻,將混合液添加至細胞培養瓶中,然后迅速轉移到液態氮中。