大鼠視網膜神經節細胞細胞簡介:
大鼠視網膜神經節細胞分離自視網膜組織得到,視網膜居于眼球壁的內層,是一層透明的薄膜。視網膜色素上皮層與脈絡膜緊密相連,由色素上皮細胞組成,它們具有支持和營養光感受器細胞、遮光、散熱以及再生和修復等作用。組織學上視網膜分為10層,由外向內分別為:色素上皮層、視維、視桿細胞層、外界膜、外顆粒層、外叢狀層、內顆粒層、內從狀層、神經節細胞層、神經纖維層、內界膜。視網膜上的感覺層是由三個神經元組成。第一神經元是視細胞層,專司感光,它包括錐細胞和桿細抱。視桿細胞主要在離中心凹較遠的視網膜上,而視維細胞則在中心凹處最多。第二層叫雙節細胞,約有10到數百個機紅胞通過雙節細胞與一個神經節細胞相聯系,負責聯絡作用。第三層叫節細胞層,專管傳導。視網膜是一層菲薄的但又非常復雜的結構,它貼于眼球的后壁部,傳遞來自視網膜感受器沖動的神經纖維跨越視網膜表面,經由視神經到達出口。視網膜神經節細胞貼壁后呈單層排列,部分細胞聚集成團,細胞呈圓形或橢圓形,核圓且相對透明,有些細胞膜上伸出短而小的突起:該細胞為高度分化細胞,在體外屬于不增殖群。視網膜神經節細胞是青光眼病理性損害的主要細胞,視網膜神經節細胞的死亡可導致視功能不可逆損傷。
大鼠視網膜神經節細胞培養操作:
1.盡量吸干凈T25瓶原培養基;
2.加3-4ml 常溫PBS輕輕潤洗細胞10-20s,吸走潤洗的PBS;
3.T25瓶加1ml左右胰M,輕輕晃動培養瓶以使胰M鋪勻瓶底細胞層;
4.將培養瓶放入37度培養箱消化;
5.消化到細胞間隙變大,但未脫落時加2-3ml培養基終止胰M消化;
6.混勻細胞,900rpm離心3-5min,棄上清;
7.加新的培養基輕輕重懸細胞,均勻分到新的培養瓶里;
8.補足培養基,將培養瓶放回培養箱靜置培養。