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人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞通過去泛素化和穩(wěn)定ＫＬＦ４抑制非小細(xì)胞肺癌

更新時(shí)間：2022-08-12瀏覽：1167次

今天我們來看看一篇關(guān)于非小細(xì)胞肺癌的文獻(xiàn)，首先還是了解下背景。

肺癌是世界上普遍認(rèn)為的死亡率最高的癌癥，沒有之一。肺癌中約有８５％是非小細(xì)胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）。據(jù)報(bào)道，早期肺癌患者５年存活率為７０％，晚期患者５年存活率不高于２０％。在如此高死亡率的情況下，找到新的靶標(biāo)分子對(duì)探索ＮＳＣＬＣ治療有非凡意義。

之前的研究發(fā)現(xiàn)，泛素化涉及包括癌癥在內(nèi)的多種疾病，被認(rèn)為是潛在的治療靶點(diǎn)。ＯＴＵＤ１作為泛素酶的一員，是由４８１個(gè)氨基酸組成的，與影響諸多分子的各種生理功能有關(guān)。在乳腺癌、胰管腺癌、甲狀腺癌等均有相關(guān)研究證實(shí)其作用，還有研究發(fā)現(xiàn)ＯＴＵＤ１與改善ＮＳＣＬＣ患者的預(yù)后有關(guān)，然而目前尚不清楚是如何影響ＮＳＣＬＣ的發(fā)展的。本文通過研究發(fā)現(xiàn)ＯＴＵＤ１在ＮＳＣＬＣ中下調(diào)并抑制癌細(xì)胞，還發(fā)現(xiàn)ＯＴＵＤ１可以去泛素化并穩(wěn)定ＫＬＦ４，這種基因在不同癌癥中可以是致癌基因也可以是腫瘤抑制因子。在本文研究中，ＯＵＴＤ１通過穩(wěn)定ＫＬＦ４蛋白抑制ＮＳＣＬＣ的發(fā)展，為ＮＳＣＬＣ患者治療提供了一個(gè)很有希望的治療靶點(diǎn)。

先看看作者用到哪些組織和細(xì)胞。

ＮＳＣＬＣ組織和癌旁組織：獲得患者同意并通過倫理審查后，取患者組織于液氮保存?zhèn)溆?，一共６組；
ＨＢＥ細(xì)胞：ＢＥＡＳ－２Ｂ細(xì)胞（人正常肺支氣管上皮細(xì)胞），ＳＮＬ－２０３；
Ａ５４９細(xì)胞：Ａ５４９細(xì)胞（人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞），ＳＮＬ－０８９；
ＰＣ９細(xì)胞：ＰＣ－９細(xì)胞（人肺腺癌細(xì)胞），ＳＮＬ－１５２；
ＮＣＩ－Ｈ１２９９細(xì)胞：ＮＣＩ－Ｈ１２９９細(xì)胞（人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞），ＳＮＬ－２２３；
Ｃａｌｕ－３細(xì)胞：Ｃａｌｕ－３細(xì)胞（人肺腺癌（胸水細(xì)胞）），ＳＮＬ－２１４；

使用到的組織和細(xì)胞還是比較多，看的出來作者還是比較希望實(shí)驗(yàn)結(jié)果更加準(zhǔn)確的。

接下來就看看作者的實(shí)驗(yàn)結(jié)果吧：

以下僅展示部分細(xì)胞實(shí)驗(yàn)結(jié)果（實(shí)驗(yàn)結(jié)果經(jīng)重新調(diào)整，非原文描述）：

作者經(jīng)ＷＢ檢測(cè)ＯＴＵＤ１蛋白表達(dá)量發(fā)現(xiàn)，患者癌組織中ＯＴＵＤ１比正常組織低（圖片ｂ，Ｔ為癌組織，Ｎ為癌旁正常組織），細(xì)胞系檢測(cè)也發(fā)現(xiàn)其在癌細(xì)胞中表達(dá)明顯低于正常細(xì)胞（圖片ｃ）。

隨后，又通過轉(zhuǎn)染方式過表達(dá)ＯＴＵＤ１方式研究Ａ５４９與ＰＣ９細(xì)胞的功能，發(fā)現(xiàn)經(jīng)過表達(dá)（圖片ｄ）后，細(xì)胞增殖活力下降（圖片ｅ），遷移率下降、侵襲能力降低（ｆ）。

再通過ｓｈＲＮＡ沉默ＯＴＵＤ１基因（圖片ｇ），發(fā)現(xiàn)沉默后的細(xì)胞增殖活力上升（圖片ｈ），細(xì)胞遷移和侵襲能力升高（圖片ｉ）。

通過ＧＥＰＩＡ數(shù)據(jù)庫(kù)篩選，作者發(fā)現(xiàn)ＯＴＵＤ１與ＫＬＦ４存在明顯正相關(guān)，隨后使用ＰＣ－９過表達(dá)和敲除ＯＴＵＤ１的細(xì)胞研究發(fā)現(xiàn)，敲除ＯＴＵＤ１發(fā)現(xiàn)ＫＬＦ４半衰期顯著降低，但敲除和過表達(dá)的細(xì)胞中ＫＬＰ４?。恚遥危帘磉_(dá)量卻沒有明顯差異，說明ＯＴＵＤ１是通過降低ＫＬＦ４的降解來穩(wěn)定ＫＬＦ４蛋白的。進(jìn)一步的研究發(fā)現(xiàn)ＯＴＵＤ１是通過去泛素化ＫＬＦ４來穩(wěn)定ＫＬＦ４蛋白的，限于篇幅，就不再展示了，有興趣的童鞋可以查看原文。

原文：ｈｔｔｐｓ：／／ｏｎｌｉｎｅｌｉｂｒａｒｙ．ｗｉｌｅｙ．ｃｏｍ／ｄｏｉ／ａｂｓ／１０．１１１１／１７５９－７７１４．１４３２０。

本文用到的細(xì)胞系，都是常用的肺相關(guān)細(xì)胞，除ＣＡＬＵ－３稍微難培養(yǎng)以外，其他細(xì)胞都是比較好培養(yǎng)的：

ＢＥＡＳ－２Ｂ細(xì)胞（人正常肺支氣管上皮細(xì)胞，ＳＮＬ－２０３）是從一位非癌個(gè)體的正常人支氣管上皮病理切片分離出上皮細(xì)胞，用腺病毒１２－ＳＶ４０病毒雜交病毒感染并克隆獲得的，細(xì)胞角蛋白及ＳＶ４０抗原染色陽(yáng)性，是肺癌細(xì)胞相關(guān)實(shí)驗(yàn)中常用的對(duì)照細(xì)胞；
Ａ５４９細(xì)胞（人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞，ＳＮＬ－０８９），該細(xì)胞系是１９７２年由ＧｉａｒｄＤＪ通過肺癌組織移植培養(yǎng)建系的，源自一位５８歲的白人男性。Ａ５４９能通過胞苷二磷脂酰膽堿途徑合成富含不飽和脂肪酸的卵磷脂，角蛋白陽(yáng)性，這個(gè)細(xì)胞大概是比較常用的肺癌細(xì)胞了；
ＰＣ－９細(xì)胞（人肺腺癌細(xì)胞，ＳＮＬ－１５２），該細(xì)胞是取自日本患者分化型肺腺癌的細(xì)胞，生長(zhǎng)時(shí)貼壁但仍會(huì)有部分圓形細(xì)胞，也是常用的肺腺癌細(xì)胞；
ＮＣＩ－Ｈ１２９９細(xì)胞（人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞，ＳＮＬ－２２３），這株細(xì)胞來源于一個(gè)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移?；颊呓邮芰顺跗诜暖煛＜?xì)胞均一性的部分缺失ｐ５３蛋白，并缺少ｐ５３蛋白表達(dá)。細(xì)胞可以合成０．１ｐｍｏｌ／毫克蛋白的ＮＭＢ蛋白，而不合成促胃液釋放肽（ＧＲＰ）??；
Ｃａｌｕ－３細(xì)胞（人肺腺癌（胸水細(xì)胞），ＳＮＬ－２１４），該細(xì)胞是從一名２５歲的白人男性肺腺癌患者的胸水中分離建立的；該患者曾使用過環(huán)磷酰胺、博來霉素、阿霉素進(jìn)行治療。該細(xì)胞接種至裸鼠可成瘤；可作轉(zhuǎn)染宿主。

END

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