bv2細胞是神經膠質細胞的一種,是中樞神經系統中的一道也是主要的一道免疫防線。中風引起的腦損傷會激活小膠質細胞,使小膠質細胞極化為M1型和M2型。M1小膠質細胞可以產生高水平的促炎細胞因子,加劇急性腦損傷,而M2型表現出對大腦具有神經保護作用,改善中風后的癥狀。然而,M2小膠質細胞介導神經保護的潛在機制仍不清楚。有文獻表明,間充質干細胞來源的外泌體有利于缺血性卒中后神經元的重塑和功能恢復,還有小膠質細胞來源的微囊泡有調節神經元興奮性的報道等。
bv2細胞復蘇實驗步驟:
1.從零下80℃冰箱或者液氮罐中取出冷凍管,迅速投入37℃水浴中,使其融化(1分鐘左右)。
2.培養基緩慢稀釋至原體積的10倍以上。
3.1低速離心10分鐘,吸去上清,加入新鮮的培養基培養剛復蘇的細胞。
3.2六個小時細胞*貼壁后吸去含有凍存液的培養基并換成*培養基。
bv2細胞傳代實驗步驟:
1.取密度80%左右的Hela細胞,吸去舊的培養基,用PBS或者Trypsin消化液潤洗細胞以減少殘留的血清對Trypsin的抑制作用。
2.吸去PBS或者Trypsin,加入Trypsin消化液,于37℃消化2~4分鐘,于倒置顯微鏡下觀察,當細胞之間出現間時或者變圓時,吸掉Trypsin 消化液。(也可以直接加入適量含血清的新鮮培養基終止Trypsin的消化作用并進行吹打分離細胞,消化細胞時應靜置以避免漂浮的細胞滾動成團)
3.加入適量新鮮培養基,用移液器上下吹打數次打散細胞團塊以盡可能形成單細胞懸液,吹打均勻后,按照稀釋比例轉移至新的培養瓶中,補充*培養基并以正常培養條件培養。